• лаборатория-217043_1280

Метод удаления клеточного мусора

После механического лизиса клеточной суспензии остается много фрагментов клеток.Как удалить эти фрагменты?Давайте рассмотрим различные подходы:

1. Используйте метод разбавления.Когда клетки разбавляются, они также могут размножаться, их становится все больше и больше, а клеточного мусора, соответственно, становится все меньше и меньше.
2. Существует также естественное расселение.Клетки оседают быстрее, чем большинство фрагментов: : Переместите суспензию клеток вцентрифужная пробиркаи когда большая часть клеток тонет, верхний раствор можно отсасывать, а затем добавлять в культуральный раствор, чтобы суспендировать клетки.Этот метод можно использовать неоднократно, при этом каждый раз можно наблюдать под микроскопом, соответствует ли он вашим требованиям.
3. Низкоскоростная центрифугаможно удалить мусор, обычно 700 г, 5 минут
4. При центрифугировании, при условии, что количество клеток достаточно, уменьшите время центрифугирования, например 5 минут, 1000 об/мин вместо 3 минут, 1000 об/мин, и удалите супернатант, поскольку в супернатанте обычно присутствуют некроз и дебрисы!Эту операцию необходимо выполнить только один раз в процессе промывки перед инкубацией!

Хотя существует множество способов удаления клеточного мусора, вы обнаружите, что центрифугирование является одним из наиболее эффективных методов!

450

А поскольку растительные ткани и клетки имеют клеточные стенки, состоящие из целлюлозы, гемицеллюлозы и пектина, для достижения этой цели обычно необходимо измельчить кварцевый песок или стеклянный порошок соответствующим экстракционным раствором или обработать целлюлазой.Фрагментация бактериальных клеток более сложна, поскольку весь скелет бактериальной клеточной стенки на самом деле представляет собой ковалентную связь пептидогликановых кистозных макромолекул, очень жесткую.Обычные методы разрушения стенок бактериальных клеток включают ультразвуковое дробление, измельчение песком, экструзию под высоким давлением или обработку лизоцимом.После разрушения ткани и клеток выбирается подходящий буфер для извлечения желаемого белка.Нерастворимые материалы, такие как фрагменты клеток, удаляютсяцентрифугаили фильтрация.

пожалуйста, свяжитесь с WhatsApp и Wechat: +86 180 8048 1709


Время публикации: 24 июля 2023 г.