Как только клетки, которые мы культивируем,

клеточный заводзаражены, с большинством из них трудно справиться.Если загрязненные клетки ценны и их трудно получить снова, для их удаления можно использовать следующие методы.

1. Используйте антибиотики

Антибиотики более эффективны в уничтожении бактерийклеточные фабрики.Комбинированные препараты более эффективны, чем лекарства по отдельности.Профилактическое лечение более эффективно, чем лечение после заражения.При профилактическом лечении обычно используется двойной антибиотик (пенициллин 100 ед/мл плюс стрептомицин 100 мкг/мл).После загрязнения метод очистки должен быть в 5–10 раз больше обычного.Препарат следует применять в течение 24–48 часов после добавления, а затем заменить обычным приемом.Культуральная жидкость.Этот метод может быть эффективен на ранних стадиях заражения.Помимо пенициллина и стрептомицина, используемые антибиотики могут также включать гентамицин, канамицин, полимиксин, тетрациклин, нистатин и т. д. Обычно используются канамицин в концентрации от 400 до 800 мкг/мл или тетрациклин в концентрации 200 мкг/мл.Среду меняют каждые 2–3 дня и передают на лечение 1–2 поколениям.В последние годы сообщалось, что 4-фтор, 2-гидроксихинолин (ципрофлоксацин, Cip), производное плейромутилина (производное плейромутилина, BM-Cyclin2: BM-1 и производное тетрациклина (BM-2)) являются антибиотиками. эффективен в уничтожении микоплазмы при использовании отдельно или в комбинации.Все эти три антибиотика готовят в виде 250-кратно концентрированных растворов в PBS и хранят при -20°C для последующего использования.Концентрация использования Cip составляет 10 мкг/мл, BM-1 — 10 мкг/мл и BM-2 — 5 мкг/мл.При использовании сначала аспирируйте загрязненную культуральную среду, добавьте культуральную среду RPMI1640, содержащую BM-1, затем аспирируйте культуральную среду через 3 дня, добавьте культуральную среду RPMI1640, содержащую BM-2, и культивируйте в течение 4 дней и так далее в течение 3 дней подряд. .раундов до тех пор, пока с помощью флуоресцентной окрашивающей микроскопии 33258 не будет доказано, что микоплазма удалена, затем добавляют нормальную культуральную среду для культивирования и пассажа 3-4 раза.

2. Термическая обработка

Инкубация зараженной культуры ткани при температуре 41°C в течение 18 часов может убить микоплазму, но оказывает неблагоприятное воздействие на клетки.Поэтому перед лечением следует провести предварительный тест, чтобы определить время нагревания, которое может убить микоплазму в максимальной степени и оказать наименьшее воздействие на клетки.Иногда этот метод ненадежен.Если сначала обработать лекарствами, а затем нагреть до 41°C, эффект будет лучше.

3. Используйте сыворотку, специфичную для микоплазмы.

Загрязнение микоплазмой можно удалить с помощью 5% иммунной сыворотки кроличьей микоплазмы (титр гемагглютинации 1:320 или выше).Поскольку специфическое антитело может ингибировать рост микоплазмы, оно становится отрицательным через 11 дней после обработки антисывороткой и остается отрицательным через 5 месяцев.является отрицательным.Однако этот метод более хлопотный и не такой удобный и экономичный, как использование антибиотиков.

4. Другие методы

Помимо вышеперечисленных методов удаления загрязнения, существуют также методы инокуляции и стерилизации животных, методы фагоцитоза макрофагов, методы добавления бромурацила к загрязненнымбутылки с культуройа затем и облучение их светом, и методы фильтрации и т. д., но все они более хлопотны и неэффективны.Поэтому, как только происходит заражение микоплазмой, если оно не имеет особенно важной ценности, ее обычно выбрасывают и повторно культивируют.

пожалуйста, свяжитесь с WhatsApp и Wechat: +86 180 8048 1709